1.固定和麻醉
胎牛原血清采集的關(guān)鍵技術(shù)主要是懷孕母牛的剖腹產(chǎn)和太牛的全封閉無菌心臟穿刺采血,對懷孕8個月左右的母牛進行剖腹產(chǎn),產(chǎn)前采用側(cè)臥保定方法固定。麻醉采取全身麻醉和術(shù)部局部麻醉相結(jié)合的方法,確實有效的麻醉師順利進行剖腹產(chǎn)的重要保障。
2.母牛剖腹,心臟穿刺
手術(shù)切口位置選擇在左肷窩腹壁的上三分之一處,優(yōu)點是靠近子宮角便于手術(shù)中縫合快速收縮的子宮,其次是內(nèi)容物不易流入腹腔,減少腹腔被污染而帶來腹,盆兩腔感染引發(fā)生殖系統(tǒng)器質(zhì)性病變的風險。因子宮收縮極快,故在胎牛取出的同時要快速縫合,然后進行心臟穿刺采血。
3.澳洲胎牛血清采集
采血前器具全部消毒,探明胎牛心臟搏動部位,消毒后針管垂直穿刺心臟采血。
4.采 血
胎牛血清采用心臟穿刺的方法采血,全部按照工業(yè)標準采血。
5.處 理
收集的血液均在冷藏條件下處理,血清和凝塊分離后立即將血清合并并冷凍。
6.熱滅活血清
熱滅活是在56℃水浴中嚴格控溫30分鐘。
7.透析血清
用12,000~14,000截留分子量的透析膜對0.15M的NaCl進行透析直到葡萄糖水平低于5mg/dl(用葡萄糖氧化酶/過氧化物酶方法檢測)。為防止沉淀和血清中多肽的滅活,不進行過度的透析,因此一些小分子量的可透析成分如氨基酸不一定*去除。
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