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產(chǎn)品名稱:

A-375細(xì)胞,人惡性黑色素瘤細(xì)胞

產(chǎn)品型號: 產(chǎn)品時間: 2024-07-28
A-375細(xì)胞,人惡性黑色素瘤細(xì)胞
細(xì)胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,細(xì)胞的特殊性決定了個體的特殊性,因此,對細(xì)胞的深入研究是揭開生命奧秘、改造生命和征服疾病的關(guān)鍵。細(xì)胞生物學(xué)已經(jīng)成為當(dāng)代生物科學(xué)中發(fā)展較快的一門*學(xué)科,是生物、農(nóng)學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧、水產(chǎn)和許多生物相關(guān)專業(yè)的一門必修課程。50年代以來諾貝爾生理與醫(yī)學(xué)獎大都授予了從事細(xì)胞生物學(xué)研究的科學(xué)家。

產(chǎn)品概述

A-375細(xì)胞,人惡性黑色素瘤細(xì)胞

產(chǎn)品名稱:A-375

細(xì)胞形態(tài):上皮樣

組織來源:

傳代情況:P4-5代T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞數(shù)量:1~3*106細(xì)胞/25cm2培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)條件:RPMI1640+10%FBS

生長條件: 95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長狀態(tài):貼壁生長

存儲條件:90%FBS+10%dmso

A-375細(xì)胞,人惡性黑色素瘤細(xì)胞

對于貼壁細(xì)胞,若細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內(nèi)。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,換成新鮮的培養(yǎng)基;如細(xì)胞還不貼壁,將細(xì)胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中,原培養(yǎng)瓶加部分新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。對于懸浮細(xì)胞:收到細(xì)胞后,將細(xì)胞全部離心,去掉舊的培養(yǎng)基,換成新鮮的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸,建議添加雙抗培養(yǎng))

(1)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天有少量或沒有飄忽的細(xì)胞可以當(dāng)天換液,因為路途顛簸造成大量飄忽的情況時,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)

(2)收到細(xì)胞后請盡快更換為含10%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)

(3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系SUER技術(shù)人員

細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項:

1)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長特性生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)

2)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決

3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)

(1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min)

(2)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存

(3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

(4)鏡下觀察消化情況,在HS505.T人淋巴結(jié)成纖維樣細(xì)胞生長特性邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml*培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。

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